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清華大學(xué)醫(yī)學(xué)院在非瘟病毒研究方面取得突破性進(jìn)展
發(fā)布時(shí)間:2019/9/21 11:10:42 發(fā)布者:傲農(nóng)集團(tuán)

  9月17日,由清華大學(xué)醫(yī)學(xué)院長(zhǎng)聘副教授、北京結(jié)構(gòu)生物學(xué)高精尖創(chuàng)新中心研究員向燁領(lǐng)導(dǎo)的團(tuán)隊(duì)在《細(xì)胞研究》(Cell Research)在線發(fā)表題為“非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72的結(jié)構(gòu)”的學(xué)術(shù)論文。

  該研究采用冷凍電鏡單顆粒三維重構(gòu)的方法,首次解析了非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72的高分辨率結(jié)構(gòu),揭示了非洲豬瘟病毒衣殼可能的組裝機(jī)制,為非洲豬瘟病毒亞單位疫苗的開發(fā)打下了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。


  非洲豬瘟病毒起源于非洲,家豬感染致死率近100%,對(duì)家豬飼養(yǎng)產(chǎn)業(yè)乃至民生經(jīng)濟(jì)都有重大的威脅。非洲豬瘟病毒在過去幾十年從非洲迅速傳播到了歐洲,南美洲以及亞洲的一些地區(qū)。

  2018年8月我國東北地區(qū)發(fā)現(xiàn)非洲豬瘟病病毒感染,很快病毒傳播到全國大部分地區(qū),造成超過千億人民幣的經(jīng)濟(jì)損失。目前緊迫需要研發(fā)有效的疫苗和防疫手段控制及預(yù)防非洲豬瘟病毒。

  應(yīng)國家之急需,由清華大學(xué)北京結(jié)構(gòu)生物學(xué)高精尖創(chuàng)新中心及北京生物結(jié)構(gòu)前沿研究中心牽頭,聯(lián)合北京大學(xué)、中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所、上海巴斯德所等單位十幾個(gè)研究組于今年4月開始非洲豬瘟病毒攻關(guān)研究。


  非洲豬瘟病毒結(jié)構(gòu):a. 依據(jù)非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72結(jié)構(gòu)模擬病毒組裝產(chǎn)生的非洲豬瘟病毒衣殼結(jié)構(gòu);b. 非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72三聚體冷凍電鏡結(jié)構(gòu)。非洲豬瘟病毒是一種雙鏈DNA病毒,擁有復(fù)雜的結(jié)構(gòu),它的基因組由兩層衣殼和兩層外膜保護(hù),衣殼主要由病毒編碼蛋白p72構(gòu)成,據(jù)以往試驗(yàn)數(shù)據(jù)估計(jì),p72占病毒顆??傊?3%左右,同時(shí)p72是被病毒感染豬血液中能檢測(cè)到的主要抗原。

  在研究p72蛋白初期,向燁研究組發(fā)現(xiàn)單獨(dú)重組表達(dá)p72蛋白不能得到有正確折疊構(gòu)象的p72蛋白,只有在p72和非洲豬瘟編碼的另一個(gè)輔助蛋白B602L共同表達(dá)的情況下,才可以得到正確折疊構(gòu)象的p72蛋白。以此為前提,研究組使用冷凍電鏡單顆粒三維重構(gòu)的方法確定了p72蛋白2.67埃的高分辨率三維結(jié)構(gòu)(上圖)。結(jié)果顯示三個(gè)p72分子形成了穩(wěn)定的三聚體形式。每個(gè)p72包含兩個(gè)串聯(lián)的卷筒蛋糕樣結(jié)構(gòu)域,每個(gè)結(jié)構(gòu)域由8個(gè)β折疊片組成,這種結(jié)構(gòu)域在大正二十面體病毒衣殼蛋白結(jié)構(gòu)中很常見。三聚體p72的六個(gè)卷筒蛋糕樣結(jié)構(gòu)一起形成了一個(gè)偽六聚體的底部錨定在病毒的內(nèi)膜上。三聚體p72折疊片之間的插入片段一起形成了一個(gè)類似于螺旋槳一樣的頂部結(jié)構(gòu)伸向病毒外部,極有可能是細(xì)胞表面受體結(jié)合區(qū)域。

  此前基于非洲豬瘟病毒p72蛋白的亞單位疫苗研究已有很多嘗試,但沒有獲得滿意的結(jié)果。分析前期相關(guān)研究失敗原因很可能是沒有使用正確折疊的p72蛋白。獲取正確折疊的p72蛋白以及確定其高分辨率結(jié)構(gòu)有助于開發(fā)靶向病毒衣殼組裝的藥物以及亞單位疫苗。目前p72亞單位疫苗的研發(fā)及評(píng)估正由清華大學(xué)和中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所聯(lián)合緊密進(jìn)行中。

  向燁副教授為本文通訊作者。清華大學(xué)生命聯(lián)合中心2014級(jí)博士生劉琦為本文第一作者,向燁實(shí)驗(yàn)室2015級(jí)博士生馬丙婷、清華大學(xué)藥學(xué)院譚旭副教授及其實(shí)驗(yàn)室成員錢年超和張帆,清華大學(xué)生命學(xué)院校級(jí)冷凍電鏡平臺(tái)主任雷建林教授參與了該工作。

  研究得到了國家蛋白質(zhì)科學(xué)研究(北京)清華大學(xué)基地冷凍電鏡平臺(tái)的大力支持,且得到了國家自然科學(xué)基金,科技部重大研發(fā)計(jì)劃,北京結(jié)構(gòu)生物學(xué)高精尖創(chuàng)新中心以及北京生物結(jié)構(gòu)前沿研究中心的大力支持。

  來源:清華大學(xué)

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