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2018年12月17日，珠海市畜牧獸醫(yī)主管部門接到香洲區(qū)報告，稱轄區(qū)內(nèi)某生豬定點(diǎn)屠宰場有豬只異常死亡之后確診為非洲豬瘟疫情，此次疫情為廣東省首例ASF疫情，也是我國公布的第93起ASF疫情。本文通過總結(jié)廣東省首例ASF疫情的診斷和處置過程，為ASF的排查、臨床診斷和處置提供參考。

一、發(fā)病情況

疫情發(fā)生地為珠海市主城區(qū)某生豬定點(diǎn)屠宰場。屠宰場有圍墻與外面道路隔離，周圍3 km范圍內(nèi)無生豬養(yǎng)殖場和生豬交易市場。發(fā)病豬同批次共50頭，由一輛運(yùn)豬車裝載進(jìn)入屠宰場。根據(jù)貨主攜帶的“動物檢疫合格證明(動物A)”溯源，該批生豬來源于廣東省佛山市某小型養(yǎng)豬場。據(jù)調(diào)查，該養(yǎng)豬場早期曾飼喂過泔水，后改用商品飼料。該批次生豬按時間分階段死亡3頭、6頭、2頭，共計11頭。

二、臨床診斷

臨床癥狀：部分發(fā)病豬精神不振，站立不穩(wěn)，體溫升高，40-41C，扎堆，個別豬排血便、脫肛(圖; 1-A) ;有的病豬四肢、耳朵、腹部和臀部皮膚發(fā)紺(圖1-B)，亦有個別豬表現(xiàn)頭部、鼻部充血潮紅癥狀。由于病程不同，豬群個體間表現(xiàn)出的臨床癥狀存在一定的差異。

剖檢病理變化

對11頭病死豬全部剖檢發(fā)現(xiàn)：脾臟腫大、增厚、變寬，約為正常的2~3倍，且發(fā)黑、質(zhì)脆(圖2-A)，腎臟腫大，嚴(yán)重淤血，表面呈現(xiàn)彌漫性的黑色淤血斑(圖2-B)，或淤血壞死、發(fā)黑(圖2-C、D)  ，小腸漿膜呈現(xiàn)彌漫性紅色出血點(diǎn)(圖2-E)或血管網(wǎng)狀充血(圖2-F):頜下淋巴結(jié)腫大，顏色發(fā)紫(圖2-G)。由于病程不同或個體耐受差異，部分病死豬內(nèi)臟并未出現(xiàn)明顯的病理變化。在不同的發(fā)病豬中，出現(xiàn)病理變化的內(nèi)臟器官個數(shù)也不盡相同，不同發(fā)病豬，同一個內(nèi)臟器官，其病變程度亦有差異。

三、采樣送檢與確診

按照《非洲豬瘟防治技術(shù)規(guī)范(試行)》和《非洲豬瘟疫情應(yīng)急預(yù)案》要求，采集3頭剖檢病變程度不同的病死豬脾臟樣品，送廣東省動物疫病預(yù)防控制中心實(shí)驗(yàn)室檢測。經(jīng)熒光PCR方法檢測，3份樣品均為ASFV核酸陽性(圖3)。將3份樣品送中國動物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心國家外來動物疫病研究中心檢測，確診為ASF。

四、疫點(diǎn)消毒與效果評價

疫情發(fā)生后，當(dāng)?shù)卣⒓磫又卮髣游镆咔閼?yīng)急響應(yīng)，按照《廣東省非洲豬瘟突發(fā)疫情應(yīng)急處置預(yù)案》，發(fā)布封鎖令，劃定疫點(diǎn)、疫區(qū)和受威脅區(qū)，嚴(yán)格處置疫情。其中，在疫區(qū)內(nèi)無害化處理了所有易感動物及其排泄物、污水等，對疫點(diǎn)進(jìn)行了全面徹底地清理和消毒，同時對不同時間的消毒效果進(jìn)行評價，并將其作為疫區(qū)解封的重要參考指標(biāo)。

消毒：按照《非洲豬瘟防治技術(shù)規(guī)范(試行)》規(guī)定，并參考聯(lián)合國糧農(nóng)組織(FAO)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)同，采用生石灰、燒堿和消特靈(二氯異氰尿酸鈉)對疫點(diǎn)進(jìn)行全面消毒，對環(huán)境使用40%辛硫磷溶液滅殺蜱蟲。

消毒范圍包括地面、車間、器具、欄舍、車輛和人員等。第1周，每天消毒5次，其中大規(guī)模消毒3次，小規(guī)模消毒2次，1周后，每天保持消毒1~3次，直至環(huán)境樣品中不再檢出ASFV核酸，然后逐漸降低消毒頻次，直至解除封鎖。

效果評價：分別于消毒1、3、7、15、17、 19d后，采集:環(huán)境樣品20-26個，采樣盡量覆蓋疫點(diǎn)內(nèi)所有環(huán)境狀況。采用磁珠法提取樣品DNA，利用熒光PCR方法進(jìn)行ASFV核酸檢測。

檢測結(jié)果顯示:消毒1 d后有2個樣品呈陽性(圖4-A)，陽性樣品采集點(diǎn)為屠宰場器具和豬圈柵欄: 3d后有1個樣品呈陽性(圖4-B) ，陽性樣品采集點(diǎn)為剖檢案板;7d后有2個樣品陽性(圖4-C)，陽性樣品采集點(diǎn)為車間整板和瓷磚縫隙: 15、 17、 19d 后全部樣品檢測結(jié)果均為陰性。 

五、討論

廣東省首例ASF疫情為一起發(fā)生在屠宰場的外地輸入性疫情，通過對這起疫情的及時準(zhǔn)確診斷和有效處置，實(shí)踐了ASF疫情防控的既定策略，且豐富了ASF的臨床觀感。診斷過程中發(fā)現(xiàn)，豬群在感染ASFV后，臨床表現(xiàn)差異較大，即使在急性死亡病例中，也并不一定會出現(xiàn)經(jīng)典文獻(xiàn)中描述的典型癥狀和病理變化。

病死豬剖檢后，有的呈現(xiàn)明顯的病理變化，有的則完全看不出病變，出現(xiàn)病變的內(nèi)臟器官，其病理變化程度也不盡相同，這在一定程度上給ASF的臨床診斷和疫情排查帶來了一定的困難。因此，必須結(jié)合流行病學(xué)調(diào)查，通過群體觀察以及盡可能多的個體診斷，如豬群出現(xiàn)發(fā)熱或無癥狀突然死亡，剖檢后小腸漿膜出血，腎臟淤血，脾臟腫大等，經(jīng)綜合分析作出初步診斷，確診必須借助實(shí)驗(yàn)室診斷。

豬群感染ASFV到發(fā)病有一定的潛伏期，而處于潛伏期內(nèi)的生豬臨床上可能不易被發(fā)現(xiàn)。這是ASF防控的難點(diǎn)，因?yàn)闈摲趦?nèi)的感染豬存在散毒風(fēng)險。這就需要對疫情盡早排查、確認(rèn)，以及對疫點(diǎn)內(nèi)的易感動物盡早進(jìn)行銷毀處置。建議在ASF疫情的排查和診斷過程中，在政府管理部門許可的條件下，按照早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早處置的原則進(jìn)行疫情處置。

從對疫點(diǎn)消毒效果的監(jiān)測結(jié)果看，消毒1d后，地面已檢測不到病毒核酸，但立面的消毒效果不如地面，臂如墻面、柵欄、器具等在消毒1d后仍能,檢測到病毒核酸，一些墊板、角落或縫隙，由于消毒或沖洗可能不如地面充分，在消毒7 d后仍然能檢測到病毒核酸。因此，對于墊板、角落或縫隙這些隱秘的地方，在消毒時絕不容忽視，在條件允許的情況下，建議采用火焰噴槍以火焰焚燒的方式殺滅病毒，避免這些地方成為病毒的“庇護(hù)所”。

在時間上，無論是地面還是立面，消毒15d后，疫點(diǎn)內(nèi)已檢不到病毒核酸。特別需要指出的是，環(huán)境樣品中檢測到病毒核酸，只能提示該環(huán)境存在生物安全風(fēng)險，并不表示該環(huán)境一定具備傳染源屬性。ASFV為雙鏈DNA病毒，相比RNA病毒，其核酸在外環(huán)境中具有較強(qiáng)的穩(wěn)定性，核酸檢測陽性理論上不能證明具有感染和復(fù)制能力的活病毒存在圖。因此，在全面消毒后，須對環(huán)境進(jìn)行徹底清洗，而且清洗效果直接影響環(huán)境樣品的核酸檢測結(jié)果。